Trypsin( 胰蛋白酶) 能够特异地水解赖氨酸和精氨酸残基的羧基端肽键。未经修饰的胰酶会自我水解,形成片段,从而干扰蛋白质测序、HPLC 或肽链的质谱分析。另外,自我水解将会导致假胰酶产生,表现出额外的胰凝乳蛋白酶的特性。Promega 的胰蛋白酶经过了甲基化还原反应修饰,极大程度的阻止自我水解。在功能稳定测试中,经过修饰的胰酶在37℃孵育3 小时后保留的活性至少是未修饰胰酶的2 倍。
经过修饰的测序级胰蛋白酶进一步经过TPCK 处理和亲和层析纯化,得到高度活性和稳定的分子。测序级修饰胰酶以每瓶20mg 冻溶液的形式提供,使用方便,并配有优化了稳定性的重悬缓冲液。建议使用蛋白酶: 蛋白比例为1:100 到1:20(w/w)。
推荐的反应缓冲液:50mM NH4HCO3 (pH 7.8)。
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