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cAMP-Glo™ Assay 是一种均质的、利用生物发光原理检测细胞内 cAMP 水平的高通量方法。cAMP-Glo™ Assay 可检测出细胞体内应答 G 蛋白偶联受体（GPCR）上的测试化合物效应而生成的 cAMP。与腺苷酸环化酶偶联的 GPCRs 会升高或降低胞内的 cAMP。这种检测方法的原理是：环状 AMP（cAMP）促进蛋白激酶 A（PKA）全酶的活性，降低 ATP，从而引起偶联的萤光素酶（luciferase）反应光信号降低。
cAMP-Glo™ Assay 可在 96 孔、384 孔和 1536 孔培养板中进行。用一种测试化合物在一段合适的时间内诱导细胞；诱导后裂解细胞，释放cAMP，接着加入含有蛋白激酶 A 的 cAMP 检测溶液。然后加入 Kinase-Glo® Reagent 终止 PKA 反应，并用萤光素酶反应检测残余 ATP。培养板放置于微孔板发光检测仪中读取数据。利用 cAMP 标准曲线，发光值和 cAMP 的浓度相关联。发光信号的半衰期超过 4 小时。信号半衰期的延长使实验用的发光检测仪不再需要带有进样器，可以直接进行多个微孔板的批量处理。
特点 - 优点
• 快速、易用：
- 检测可在大约 45 分钟内完成。 - 均质。 - 裂解细胞后只需两步。 • 信噪比优良： - 在所有的检测 cAMP 的试剂盒中，信号/ 背景的比率最高。 - 信号/ 背景的比率 >200（cAMP），>15（细胞）。 - 体系易于调整为 1536 孔板和更多孔培养板。 • 行之有效的发光技术： - Ultra-Glo™ 重组萤光素酶驱动。 - 无荧光化合物的干扰。 - 无放射性。 应用• 对文库化合物进行高通量筛选，鉴定 GPCR 活性调节物 注意事项
Cat.# V1501 能够在 384 孔板内完成 300 次实验，每次最终用量为 60μl。Cat.# V1502 能够在 384 孔板内完成 3,000 次实验，每次最终用量为 60μl。 |
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