ProFluor® Tyrosine Phosphatase Assay(ProFluor® 酪氨酸蛋白磷酸酶检测试剂盒)能够以多孔板的模式检测纯化的酪氨酸磷酸酶的活力,检测的步骤仅需“加样-混合-检测”,是高通量应用的理想选择。使用该试剂盒检测过的酪氨酸磷酸酶包括 PTP-1B、CD45 、LAR PTPase 和 YOP-51。检测的第一步是一个标准的磷酸酶反应,采用的底物是双酰胺罗丹明 110 标记的肽底物(PTPase R110 底物),以及 AMC 对照底物(检测那些可能具有磷酸酶抑制作用的受试化合物时,用作对照),上述两种肽底物由试剂盒提供。磷酸酶反应完成后,加入含有蛋白酶的终止缓冲液,可以停止磷酸酶反应,同时特异性地从非磷酸化的底物上去除氨基酸、释放出发荧光的罗丹明 110。另一方面,磷酸化的底物可对抗蛋白酶的消化作用,因此不能发出荧光。所以,使用该试剂盒检测到的荧光强度与磷酸酶的活力成正比。这种试剂盒无论在 96 孔板还是 384 孔板读数仪上都能够取得良好的 Z` 值(>0.7),可轻松地将其它化合物与已知的磷酸酶抑制剂区分开。 特点 - 优点• 可得到良好的结果:无论在 96 孔板还是 384 孔板上都可取得良好的 Z` 值(>0.8)。 • 待检化合物的干扰最小:底物用微摩尔级的浓度,罗丹明 110 的荧光信号强于其他测试化合物的荧光信号。 • 含有对照物:同时提供对照物(AAF-AMC),可有效减少假阳性率。 • 简化了您的操作:相比于其它的磷酸酶检测试剂盒,本试剂盒的简单的“加样-混合-检测”步骤使操作变得更轻松。 • 非放射性:不产生放射性废物和安全隐患。 • 可定制或批量订购 应用更多信息,请见 Protocols & Applications Guide。 |
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