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Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor 2,500u

价:
465.00
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¥465.00

号:N2511

牌:Promega 普洛麦格

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RNA酶广泛存在,导致RNA降解,破坏RNA的完整性。Native和Recombinant RNasin® Inhibitor(天然和重组RNasin®抑制剂)是分子量为50kDa的蛋白,通过非共价键以1:1的比例结合RNase,可抑制RNase A家族和人胎盘RNase。可用于下游应用GoScriptTM Reverse Transcriptase、AMV/M-MLV Reverse Transcriptase、SP6、T7/T3 RNA聚合酶和Taq DNA聚合酶的试验。Recombinant RNasin® Inhibitor不抑制RNase T1、S1核酸酶、曲霉(Aspergillus)来源的RNase以及RNase H、RNase ONETM Ribonuclease和其它酶类。Learn more about these products.

RNasin® Plus RNase Inhibitor是一种作为可溶性蛋白在E. coli中表达的重组哺乳动物RNase抑制剂,可以利用离子交换和疏水层析相结合的方法纯化获得。该蛋白能够抑制真核RNase(如RNase A和RNase B)活性,与人胎盘RNase抑制剂相似。RNasin® Plus RNase Inhibitor经过RT-PCR检验,能与AMV、M-MLV、ImProm-IITMReverse Transcriptase或TaqTfl DNA Polymerase兼容。RNasin® Plus RNase Inhibitor也能和TaqMan®定量、实时RT-PCR兼容。

与人源的这种蛋白相比,RNasin® Plus RNase Inhibitor具有更高的抗氧化活性。研究表明来源于人的该蛋白的两个半胱氨酸对氧化非常敏感,并形成二硫键封闭了抑制剂的活性位点。利用天然氨基酸的多样性,RNasin® Plus RNase Inhibitor不会形成封闭活性位点的二硫键。此外,还发现这种重组蛋白具有以前从未认识的特性,即在50°C以上能持续抑制RNase。将RNasin® Plus RNase Inhibitor和RNase的溶液加热再冷却,不会造成RNase活性的恢复——即使溶液温度超过RNasin® Plus蛋白的变性温度。因此,RNasin® Plus RNase Inhibitor能够在加热前、加热中及加热后保护RNA,即使在RT-PCR中第一链DNA合成温度下亦如此。溶液加热至70°C,15分钟,没有观察到RNase的活性恢复。

 

 

 

特点 - 优点

  • 广谱的RNase抑制剂:抑制常见真核生物的RNase。
  • 可与多种酶共同使用:不会抑制SP6、T7、T3 RNA Polymerase;GoScript™ Reverse Transcriptase、AMV或M-MLV Reverse Transcriptase;以及Taq DNA polymerase的活性。
  • 用于多种下游试验:PH范围宽(PH5-8)。
  • 天然和重组两种形式可选:重组形式的RNase抑制剂来源于细菌,减少了人类核酸的污染。

RNasin® Plus RNase Inhibitor also can:

  •  增强的抗氧化能力:借助于天然氨基酸的多样性,RNasin® Plus RNase Inhibitor不能形成人源蛋白在氧化条件下会形成的封闭活性位点的二硫键。
  •  高纯度:RNasin® Plus RNase Inhibitor是E. coli表达的可溶蛋白,利用离子交换和疏水层析相结合的方法很容易纯化获得。不需要直接亲和层析。这种方法可产生纯度>90%的抑制剂蛋白,无E. coli RNase残留。
  • 与RT-PCR系统兼容:已经证明RNasin® Plus RNase Inhibitor可与Access和Access QuickTM RT-PCR System、M-MLV Reverse Transcriptase、ImProm-IITMReverse Transcription System和GoScript™ Reverse Transcription System兼容。同样也与基于TaqMan®的RT-PCR systems兼容。
  • 在RNA模板变性过程中保护RNA:即使在70°C加热RNasin® Plus RNase Inhibitor和RNase的混合物15分钟,也不会导致RNA酶的活性复苏。许多RT-PCR操作方法需要在RT 反应前将RNA模板在RT引物存在时变性(例如65-70°C, 5-10分钟)以获得最大灵敏度。现在您可以在这一步骤中使用RNasin® Plus RNase Inhibitor。
  •  可保护较高温度下的RT反应:使用ImProm-IITM和AMV Reverse Transcriptase等进行RT反应时,可加入RNasin® Plus RNase Inhibitor,在50°C以上进行反应。可能存在的RNase在高温下会失活。

应用

  • RT-PCR和RT-qPCR。
  • 用于受真核生物RNase污染影响的任何试验。
  • 在cDNA合成反应中保护mRNA。
  • 无RNase抗体染色。
  • 体外转录/翻译。
  • 转录/翻译偶联试验。
  • 增加多核糖体的产量和活性。
  • 增强病毒体外复制。
  • 增强同源系统中RNA的翻译。
  • 使用Riboprobe® System合成超高量的RNA。

 

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