Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase, RNase H Minus, (M-MLV RT [H–]), Point Mutant, 点突变型M-MLV逆转录酶,RNase H 缺失) 是RNA 依赖的DNA 聚合酶,可用于长mRNA (>5kb) 为模板的cDNA 合成。RNase H 活性的缺失有利于其应用,因为在长孵育时间的时候,RNase H 会开始降解模板。虽然许多研究者已经成功使用M-MLV RT(H+) 进行了一些cDNA 制备应用及分析,但是缺失了RNase H 活性的逆转录酶为长cDNA 的制备及包含高比例全长cDNA 的文库制备提供了更好的选择。 特点 - 优点
• 无RNase H 活性:为以长RNA 为模板制备全长cDNA 提供了优化条件。
• 温度稳定性:点突变产物的热稳定性可防止与二级结构相关的问题。 • 聚合酶活性增强:M-MLV RT [H-], Point Mutant (Cat.# M3681)与缺失突变得到的M-MLV RT(Cat.# M5301) 相比,具有更高的cDNA 产率。 • 提供5× 反应缓冲液:250mM Tris-HCl (pH 8.3,25℃ ),375mM KCl,15mM MgCl2,50mM DTT。 • 广泛的工作范围:提高了逆转录的性能,使得可以在更广泛的酶浓度和底物浓度的条件下工作。 应用• cDNA第一链合成 • 引物延伸 |
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