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DNA Polymerase I Large（Klenow）Fragment（DNA 聚合酶 I 大（Klenow）片段）是 DNA 依赖的 DNA 聚合酶，它没有完整的 E.coli DNA Polymerase I 所具有的 5'→ 3' 外切酶活性，但保留了 5'→ 3' 聚合酶、3'→ 5' 外切酶及链置换活性。该酶是 DNA 聚合酶 I 的 C- 末端片段，68kDa。Klenow 片段 5'→ 3' 聚合酶活性经常被用于以非标记的或标记的 dNTPs 补平5'- 突出端、单链或双链 DNA 模板测序、合成寡核苷酸进行体外突变、cDNA 第二链合成以及制备单链 DNA 探针。3'→ 5' 外切酶活性可用于从 3'- 突出端产生平末端。 特点 - 优点• 灵活性：DNA Polymerase I Large（Klenow）Fragment 可用于多种分子实验。在多种 Promega 1× 内切酶缓冲液中它都能保持活性。• 高温灭活：DNA Polymerase I Large（Klenow）Fragment 在 75℃加热 10 分钟失活。 • 提供 10× 反应缓冲液：500mM Tris-HCl（pH 7.2，25℃），100mM MgSO4，1mM DTT。 应用• 标记或填补 5’突出的双链 DNA 的 3'端 • 第二链 cDNA 合成 • 双脱氧法进行 DNA 测序 |
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