Exonuclease III(核酸外切酶III)是一种特异的双链 DNA 3'→ 5' 核酸外切酶。该酶催化从缺口、平端、凹端及少于 4 个碱基的 3'- 突出端的 3'-OH 处将单核苷酸逐个去除的反应,产生 5`- 磷酸核苷。Exonuclease III 具有内在的 3'- 磷酸酶活性,因此也可从 3'- 磷酸末端降解 DNA。另外,该酶还具有类脱嘌呤核酸内切酶活性及核糖核酸酶 H 活性。Exonuclease III 与 S1 核酸酶联用,可从 DNA 片段的末端单向删除序列。 特点 - 优点• 灵活:通过改变孵育温度来控制降解速度。• 高温失活:Exonuclease III 在 75℃加热 10 分钟失活。 • 提供 10× 反应缓冲液:660mM Tris-HCl(pH 8.0,25℃),6.6mM MgCl2。 应用• 通过嵌套删除产生双链线性 DNA • 制备单链 DNA |
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