T4 RNA Ligase(T4 RNA 连接酶)催化依赖于 ATP 的连接反应,将单链 RNA 或 DNA 与 5'- 磷酸末端的单链 RNA 或 DNA 相连。该酶从重组 E.coli CA4 (RNase I- 缺失)中纯化而来,分子量为 43.5kDa。T4 RNA Ligase 也可催化在单链 RNA 分子上添加 [5'-32P] 核苷酸和 3', 5'- 双磷酸的反应。 特点 - 优点• 高温失活:T4 RNA Ligase 在 65℃加热 15 分钟失活。• 提供 10× 反应缓冲液:500mM Tris-HCl(pH 7.8,25℃)、100mM MgCl2、50mM DTT、10mM ATP。 应用• 连接单链 RNA • RNA 3' 末端标记 • RNA 和 DNA 寡聚核苷酸的环化 • 克隆全长 cDNA |
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