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E.coli S30 Extract for Circular DNA（用于环状 DNA 模板的 E.coli S30 提取物系统）简化了在质粒或 λ 载体中克隆的 DNA 序列的转录和翻译，提供了鉴定和研究多肽特征的有力工具。研究者只需准备含有合适的原核启动子和核糖体结合位点的克隆 DNA 即可。这种提取物的制备采用并改进了 Zubay 描述的方法，是从 OmpT 内蛋白酶和 lon蛋白酶活性缺失的大肠杆菌 B 株制得。从而极大地增强了表达蛋白的稳定性，因为若在体内翻译的话，表达的目标蛋白将会被蛋白酶降解。由于宿主编码的抑制物的存在，某些蛋白在体内表达的水平很低，使用 S30 体外系统可提高这些蛋白的翻译水平。
特点 - 优点
• 更好的稳定性：降低了表达蛋白被降解的机会。
• 完备：包含了偶联的转录/ 翻译反应需要的所有组分。 • 低背景：系统合成的内源蛋白质水平极低。 • 经过优化：每批 S30 提取物的预混合物已经经过优化，包括所有其它必需组分（氨基酸除外），如核糖体、各种tRNAs、PEP（磷酸烯醇丙酮酸）和盐类。 应用• 调控原核基因表达 • 鉴定克隆的 DNA 基因产物或明确的 DNA 片段的多肽谱 • 快速筛选克隆到专门用于在 E.coli 中高表达载体的真核或原核 DNAs 的翻译 • 筛选抑制细菌翻译的化合物 更多信息，请参看“Protocols & Applications Guide”。 |
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