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ApoLive-Glo™ Multiplex Assay（ApoLive-Glo™ 多重检测试剂盒）在一个检测孔中，既能检测以活细胞数目为标志的细胞毒作用，又能检测以 caspase 活化作用为标志的细胞凋亡，从而确定细胞死亡的机理。该试剂盒的第一部分先检测标志着细胞活力的蛋白酶的活性。此蛋白酶仅在活细胞内表现出活性，可利用能够产生荧光的、可渗透进入细胞的多肽底物（甘氨酰 - 苯丙氨酰 - 氨基荧光香豆素，GF-AFC）进行检测。该底物进入胞膜完整的细胞后，被活细胞相关的蛋白酶剪切，生成荧光信号，信号强度与活细胞数目成正比。当细胞膜完整性缺失，细胞内容物渗漏到周围培养基时，活细胞相关的蛋白酶即失活。该试剂盒的第二部分使用 Caspase-Glo® 检测技术来检查 caspase 的活化作用，caspase 的活化是细胞凋亡的关键生物标志物。 Caspase-Glo ® 检测试剂盒提供能发光的 caspase-3/7 底物，该底物含有四肽序列 DEVD，试剂盒中的试剂针对 caspase 活性、萤光素酶活性和细胞裂解作了优化。以“加样 - 混合 - 检测”的模式加入 Caspase-Glo® 3/7 试剂，可以使细胞裂解，接着 caspase 剪切底物，并由萤光素酶产生“辉光型”的发光信号。发光强度与存在的 caspase 的激活成正比。
特点 - 优点• 在同一个样品孔中 同时检测活力和凋亡：准确确定细胞死亡机制，耗时少、样品消耗少。 • 易于操作：该检测只需简单地按“加样 - 混合 - 检测”的顺序进行。 • 以细胞活力为对照，对 caspase 数据进行归一化处理：caspase 活力与活细胞的比值对于确定 caspase 激活的程度和归一化细胞总数非常有用。 • 应用灵活，便于自动化：每个检测组分的体积是可调的，以适合不同的通量要求，该试剂盒适于 96 和 384 孔板的自动化检测。 • 与其它试剂盒进行叠加检测：检测的第一步不需要裂解细胞，这样可以叠加处于不同检测波长的荧光检测试剂盒。 应用• 检测细胞死亡机制 • 筛选化合物毒性 |
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