pSP-luc +NF Fusion Vector(pSP-luc +NF 融合载体)是一种盒式萤光素酶载体,含有工程化的萤火虫萤光素酶基因 luc +NF。luc +NF 基因与真核报告基因载体 pGL3 家族中的 luc + 基因相关,但已经在萤光素酶的 N 端融合区(NF)进行了进一步的改进以获得最大的灵活性。在表达载体中亚克隆 luc +NF,提供了具有超常灵敏度的可遗传的报告基因。pSP-luc +NF 融合载体本身并不是用于在真核细胞中表达萤光素酶的,因为它不包含真核启动子、增强子或多聚腺苷酸信号。
紧邻萤光素酶 ATG 翻译密码子的下游插入了一个独特的 BstEII 位点,这样可以将克隆的片段插入到紧邻 luc +NF 起始密码子的下游。当融合蛋白中萤光素酶的 N 端不带有 ATG 密码子时,推荐使用该载体。 luc +NF 基因位于 SP6 启动子和核糖体结合位点的下游,另有一个反向的 T7 启动子位于 luc +NF 基因的下游。这样,pSP-luc +NF 融合载体就成为一个方便的模板,用于体外合成萤光素酶转录本的正义链和反义链,进行原位杂交、RNA 加工、RNA 转染或偶联的转录/ 翻译以及蛋白折叠等方面的研究。含常用限制性内切酶识别序列的多克隆区域位于 luc +NF 的 5'末端及 3'末端,以提供最大限度的克隆灵活性。用萤光素酶检测系统可对萤光素酶活性进行最有效的检测。 特点 - 优点
• 灵活:多克隆位点区域位于 luc + NF 基因的 5'和 3'末端,以提供最大的克隆灵活性。
• N 端与萤光素酶融合:独有的 BstEII 位点紧接着萤光素酶 ATG 翻译密码子的下游。 |
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