凝胶迁移或电泳迁移率检测是一种用于检测 DNA 结合蛋白的简单而快速的方法。这种方法被广泛用于序列特异 DNA 结合蛋白的研究,如转录因子。该检测基于蛋白和 DNA 的复合体在非变性聚丙烯酰氨凝胶中的迁移速率大大低于 DNA 片段或双链寡核苷酸的迁移速率。凝胶迁移实验首先是将纯化蛋白或蛋白混合物(如核或细胞提取物)与 32P 末端标记的可能含有蛋白结合位点的 DNA 片段共同孵育。然后用非变性聚丙烯酰氨凝胶分析反应产物。使用未标记的 DNA 片段或含有目的蛋白结合位点的寡核苷酸或其它无关的 DNA 序列进行竞争性实验,来确定 DNA 结合蛋白假定结合位点的特异性。 特点 - 优点
• 阳性对照:核心系统包括 HeLa 细胞核提取物及 AP2 和 SP1 共有寡核苷酸。
• 通用:寡核苷酸可以 5'末端标记,并用作蛋白特异探针或在竞争性实验中用作非标记的寡核苷酸。 应用• 检测 DNA 结合蛋白结合的转录因子序列或您选择的 DNA 序列 更多信息,请参见“Protocols & Applications Guide”。 |
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