The Flexi® Vector System 是一种简单而强大的蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性内切酶 SgfI和 PmeI 基础上,可以将蛋白编码区在不同的 Flexi® 载体之间转换,而不需要重新测序,该方法快速、有效、保真度高。 这些载体是通过 CMV 启动,使哺乳动物细胞中带有或不带有选择标签的蛋白进行高水平表达的一类特定载体。pF9A 载体带有海肾萤光素酶基因,可以作为转染对照。当外源蛋白(如转录因子受体)的表达用于报告基因检测时,pF9A 载体可以与 pGL4 萤光素酶的载体配合使用。所有的插入片段可以通过TnT® T7 无细胞表达快速系统(Cat.# L1170)来证实。 说明:Flexi® 载体带有致死性的 barnase 基因,可以减少载体构建过程中不带有插入片段的阴性克隆产生。使用 Flexi® Vector Cloning System,可将barnase 基因替换为插入的目的 DNA 片段。在没有插入目的 DNA 片段的情况下,购买的此类载体无法在常用的实验用大肠杆菌菌株中生长。 特点 - 优点• 通用:您可以随意进行众多试验应用(如细菌或哺乳动物蛋白的细胞内表达、无细胞表达),然后还可以根据需要转向其他实验。 • 省时:高效的转移能够直接利用重组克隆,减少浪费在筛选本底克隆上的时间。 • 提供生产能力:对于大规模筛选的需求,可调整至高通量模式。 • 易于获得:不需要许可证书费用,没有复杂的转移限制。 应用• 进行 ORF 克隆,并将克隆产物插入到不同种类的载体中用于不同的反应 更多信息,请见 Protocols & Applications Guide。 |
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