CheckMate™/Flexi® Vector Mammalian Two-Hybrid System（CheckMate™/Flexi® 哺乳动物双杂交系统）将酵母双杂交系统的原理应用于哺乳动物。待检测蛋白相互作用的蛋白分别插入到 BIND（pFN11A）和 ACT（pFN10A）载体，并与报告基因载体 pGL4.31 一起共转染到细胞中。如果蛋白有相互作用， GAL4 DNA结合结构域（BIND）会与 VP16 激活结构域（ACT）靠近，启动 pGL4.31 报告基因载体的转录，产生萤火虫萤光素酶。相互作用通过 Dual-Luciferase® 报告基因检测系统检测。pFN11A 载体也可用作产生 SV40-启动子启动的海肾萤光素酶。

特点 - 优点

更好的灵敏性和生物相关性：

• 增强的报告基因表达：为哺乳动物表达优化了合成基因密码子。
• 减少背景和表达假象：去除隐藏的 DNA 调控元件和转录因子结合位点。
• 改进的瞬时应答：Rapid Response™ 技术应用去稳萤光素酶。

其他优势包括：

• 检测灵活：可选择萤火虫 luc2 或海肾 hRluc 萤光素酶报告基因。
• 轻松从瞬时转染过渡到稳转细胞系：提供哺乳动物筛选标记。
• 方便从一种载体转换为另一种载体：提供常规的多克隆位点和独特的 SfiI 转换方案。 

应用

• 转录调控

• 病毒-细胞相互作用

• 化合物筛选

• 翻译后修饰研究

• GPCR 信号通路研究

• 细胞信号通路研究

• 启动子分析

更多信息，请查看 Protocols & Applications Guide。