CheckMate™/Flexi® Vector Mammalian Two-Hybrid System（CheckMate™/Flexi® 哺乳动物双杂交系统）提供一种手段，可用于确定、印证和研究两种蛋白或结构域间可能的相互作用，也可用于构建稳定的细胞系进行基于细胞的检测。哺乳动物来源的目标蛋白，系统可在模仿细胞自然环境的情况下表达并进行翻译后修饰。在酵母双杂交系统中，目标蛋白（“X”） 与 DNA 结合结构域区融合，另一蛋白（“Y”）与转录激活结构域融合。

该系统基于三种质粒共转染进入哺乳动物细胞，而且每种质粒皆有独一无二的特点。pFN10A（ACT）Flexi® Vector（pFN10A (ACT) Flexi® 载体）在克隆位点上游含有疱疹单病毒 VP16 的转录激活结构域；pFN11A（BIND）Flexi® Vector（pFN11A（BIND）Flexi® 载体）在克隆位点上游含有酵母 GAL4DNA 结合结构域；pFN11A（BIND）Flexi® Vector（pFN11A（BIND）lexi® 载体）在 SV40 启动子的调控下可表达海肾萤光素酶，进而可校准转染效率的不同。第三个载体 pGL4.31 [luc2P/Gal4 UAS/Hygro] Vector 含有五个位于最小 TATA 盒上游的 GAL4 结合位点，该位点位于萤火虫萤光素酶基因上游，作为蛋白 X 与蛋白 Y 相互作用的报告基因。

CheckMate™/Flexi® 哺乳动物双杂交载体系统区别于以前的 CheckMate™ 哺乳动物双杂交系统，可与 Flexi® 载体系统兼容，这样在不同的 Flexi® 载体间直接克隆和迅速有效的高保真转移蛋白编码区成为可能。

特点 - 优点

应用

• 研究并确认证实可疑蛋白及结构域之间的相互作用

更多信息，请参见“Protocols & Applications Guide”。