荧光染料Hoechst33342能少许进入正常细胞膜,使其染上低蓝色,而凋亡细胞的膜通透性增强,因此进入凋亡细胞中的Hoechst33342比正常细胞的多,荧光强度要比正常细胞中要高,此外,凋亡细胞的染色体DNA的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA结合,并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将Hoechst33342排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。而PI染料是不能进入细胞膜完整的正常细胞和凋亡细胞中,即活细胞对PI染料拒染,而坏死细胞由于膜完整性在早期即已破损,可被PI染料染色。用Hoechst33342结合PI染料对凋亡细胞进行双染色,就可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。在双变量流式细胞仪的散点图上,这三群细胞表现分别为:正常细胞为低蓝色/低红色(Hoechst33342+/PI+),凋亡细胞为高蓝色/低红色(Hoechst33342++/PI+),坏死细胞为低蓝色/高红色(Hoechst33342+/PI++)。
产品组份: | 双染 Hoechst33342 染液:1.0ml双染 PI染液:500μl双染 10×Buffer A:10ml |
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应用实验类型: | 细胞凋亡检测 |
检测方法: | 荧光成像 |
特殊物理化学性质说明: | Hoechst33342:Ex/Em=346nm/460nmPI:Ex/Em=488nm/630nm |
试剂盒保存温度: | 2-8℃,保存12个月,避光,特殊组分保存条件详见说明书。 |
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