Product Brief

Instructions

标准品以及工作液的制备：
A. 牛血清白蛋白标准品稀释液的制备

注意：上表适用于微孔板法的标准品稀释，试管法的标准品稀释可按照具体使用量进行比例扩大。
B. 微量BCA工作液的制备
1.使用下列公式计算出所需工作液的总体积：
(标准孔数 +待测样品孔数) × (重复数) × (每个样品孔的工作液体积) = 所需工作液的总体积
例如: 标准的试管测定每个样品需要3个不同的稀释度和2次重复(8个标准孔 + 3个待测样品孔) × (2重复) × (1 ml) = 22 ml BCA工作液 (可以多配到25 ml)。
注意：在试管检测法中，每个样品需要1ml的工作液，在微孔板检测中，每个样品需要150μl的工作液。
2.配制 BCA 工作液：
先将溶液A、溶液B 和溶液C 按50：48：2 的比例混合，所得溶液即BCA 工作液。比如：5 ml 溶液A + 4.8 mL 溶液B +200ul溶液C。
注意：试剂C刚加入到试剂A和试剂B中时，会产生浑浊并迅速消失呈清绿色溶液。制备足够体积的工作液以检测相应数量的样品。
使用方法：
一：微孔板测定法
1. 吸取150ul的标准品及未知样品分别至微孔板中。
2. 滴加150ul的工作液到每孔中并充分混合30秒。
3. 盖上微孔板，60℃放置 1 小时。
4. 微孔板冷却至室温。
5. 用酶标仪测量562nm时的吸光值。
注意：冷却至室温后依然会继续显色。但是在室温时的显色比例已经很低，在10分钟内检测到的吸收值
一般都不会有太大误差。
6. 根据标准曲线计算每个待测样品的蛋白浓度。二：试管测定法
1. 吸取1.0ml的标准品及未知样品分别至对应标记的检测管中。
2. 滴加1.0ml的工作液至每管中并充分混合。
3. 盖上检测管并于60°C水浴孵育1个小时。
4. 所有试管冷却至室温。
5. 用分光光度计测量562nm时的吸光值。
注意：冷却至室温后依然会继续显色。但是在室温时的显色比例已经很低，在10分钟内检测到的吸收值
一般都不会有太大误差。
6. 根据标准曲线计算每个待测样品的蛋白浓度。