免疫共沉淀技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法,可以在顺利条件下检测蛋白质间的相互作用。首先以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体Fc端结合的ProteinA/G(固化在琼脂糖上),形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-ProteinA/G琼脂糖颗粒”的复合物。该试剂盒通过特殊设计,整个过程是在mini-spin column中进行,而不是在微量离心管中,这样使得抗原-抗体结合珠的洗涤更加方便。
用于检测蛋白间相互作用
10x Lysis buffer; PMSF; 10x IP; SDS(10%); NaCl(5M); Protein G- Agarose; 20x PBS; 1x loading buffer; Spin columns, tubes, caps
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