AMV Reverse Transcriptase (RT)是由大肠杆菌表达的重组禽类成髓细胞瘤逆转录酶。AMV RT是一个异源二聚体,由两个不同的亚基组成(alpha和beta亚基)。AMV RT 具有多种活性,包括RNA和DNA依赖的DNA polymerase活性、DNA-RNA解旋活性、序列特异的Mn2+依赖性内切核酸酶活性和RNase H (45~60°C)内保持活性,因此可逆转录含有大量二级结构的RNA。
第一链cDNA合成,用于RT-PCR和实时RT-PCR;可提高反应温度降低二级结构对逆转录的影响;合成cDNA,用于克隆和表达研究;合成标记的cDNA探针;引物延伸法分析RNA
一个活性单位是指在37°C、10分钟内将1 nmol dTMP合成掺入多聚的核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
保 存 液 | 200 mM磷酸钾,2 mM DTT,0.2% (V/V) Triton X-100和50%(V/V)甘油(pH 7.2) |
5XAMV RT 缓冲液 | 250 mM Tris-HCl(pH 8.5, 25°C),40 mM MgCl2,150 mM KCl,5 mM DTT |
抑制剂 | 金属鏊合剂和无机磷酸盐。焦磷酸钠可降低AMV RT活性,但是当其浓度 ≤ 4 mM 时可增加全长cDNA的产量 |
失活温度 | 85°C加热5分钟 |
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